GDF-8 1mg/vial Thúc đẩy đáng kể khối lượng cơ bắp và cải thiện sức mạnh

GDF-8 1mg/lõi chai giới thiệu

Myostatin|Yếu tố tăng trưởng chuyển đổi- Superfamily Member 1mg/lọ

Tên chung: Myostatin (Yếu tố khác biệt tăng trưởng-8)

tên tiếng anh: Myostatin (Yếu tố khác biệt tăng trưởng 8, GDF-8)

Cấu trúc protein: Các peptit trưởng thành là các chất đồng phân, với mỗi chuỗi chứa khoảng 110 axit amin.

Trọng lượng phân tử: Khoảng 25 kDa (dạng monome)

độ tinh khiết: Lớn hơn hoặc bằng 90% (SDS-TRANG/HPLC)

Nội dung: 1mg/chai

Vẻ bề ngoài: Bột đông khô màu trắng

Kho: Làm đông lạnh ở -80 độ, tránh ánh sáng, bảo quản nơi khô ráo.

Hướng dẫn sử dụng và bảo quản

GDF-8 (myostatin):

GDF-8, một thành viên của siêu họ yếu tố tăng trưởng biến đổi-, chủ yếu được biểu hiện ở cơ xương. Là một chất điều chỉnh tiêu cực cho sự phát triển của cơ, nó kiểm soát chính xác khối lượng cơ xương bằng cách liên kết với đường truyền tín hiệu IIB/ALK4/5 của thụ thể hoạt hóa, ức chế sự tăng sinh và biệt hóa nguyên bào cơ. Là một protein báo hiệu phản hồi tiêu cực quan trọng cho sự phát triển cơ bắp, nó đóng vai trò trung tâm trong các mô hình thử nghiệm về phát triển, tái tạo, teo cơ (chẳng hạn như chứng suy nhược do ung thư và tình trạng thiểu cơ liên quan đến tuổi-) ​​và các bệnh chuyển hóa. So với các yếu tố thúc đẩy quá trình đồng hóa, các đặc tính điều hòa tiêu cực của nó mang lại một góc nhìn độc đáo để hiểu được cơ chế cân bằng của cân bằng nội môi cơ.

Do vai trò điều tiết tiêu cực quan trọng của nó đối với sự phát triển cơ bắp, GDF{2}}8 được các nhà nghiên cứu sử dụng rộng rãi trong sinh học cơ, y học tái tạo, sinh lý học tập thể dục và các bệnh chuyển hóa. So với các mô hình loại bỏ gen, dạng protein tái tổ hợp của nó cung cấp một công cụ thí nghiệm được tiêu chuẩn hóa để kiểm soát chính xác cường độ của tín hiệu ức chế, nghiên cứu phản ứng liều lượng và các quá trình thời gian trong ống nghiệm và in vivo. Ứng dụng của nó trong các nghiên cứu về rối loạn tái tạo cơ, mô hình teo cơ và nghiên cứu trao đổi chất liên quan đến tương tác cơ-mỡ cung cấp nền tảng để đánh giá các chiến lược can thiệp tiềm năng nhắm vào con đường GDF-8.

Ứng dụng GDF-8:

Là một chất điều chỉnh tiêu cực cổ điển đối với sự phát triển của cơ, nó được sử dụng trong các mô hình in vitro và in vivo để mô phỏng hoặc tăng cường chính xác các tín hiệu ức chế tăng trưởng cơ, từ đó nghiên cứu tác dụng ức chế của nó đối với sự tăng sinh nguyên bào cơ, sự biệt hóa, khối lượng cơ xương và chức năng. Nó chủ yếu được sử dụng để khám phá các cơ chế phân tử của chứng teo cơ, khả năng tái tạo cơ bị suy giảm và sự tương tác giữa cơ và các mô khác (chẳng hạn như mỡ và xương).

Nó được sử dụng rộng rãi trong các mô hình teo cơ, nghiên cứu về chức năng nguyên bào cơ/tế bào vệ tinh, thí nghiệm tái tạo cơ và nghiên cứu về rối loạn chuyển hóa cơ liên quan đến béo phì và tiểu đường. Dạng protein tái tổ hợp được tiêu chuẩn hóa của nó cung cấp công cụ nghiên cứu cốt lõi để đánh giá các loại thuốc chống teo cơ mới, nghiên cứu cơ sở phân tử của sự thích ứng khi tập thể dục và khám phá các chiến lược trị liệu nhắm vào tín hiệu GDF-8.

Phương pháp sử dụng và bảo quản

1. Hoàn nguyên và chuẩn bị:

Dung môi khuyến nghị:

Dung môi ưa thích: Pha loãng dung dịch axit axetic có pH 4,0-5,0 (ví dụ axit axetic 20mM).

Nhà cung cấp chìa khóa: Protein vận chuyển phải được bổ sungvào dung môi và tất cả các chất pha loãng;Nên sử dụng dung dịch axit axetic vô trùng chứa 0,1% albumin huyết thanh bò (BSA).

Pha loãng dung dịch làm việc: Pha loãng đến pH sinh lý bằngPBS vô trùng hoặc môi trường nuôi cấy tế bào chứa 0,1-1% BSA.

Tuyệt đối bị cấm: Nghiêm cấm hòa tan hoặc pha loãng trực tiếp protein bằng nước tinh khiết, PBS trung tính hoặc dung dịch không có protein vận chuyển,nếu không thì sự tổng hợp, kết tủa và bất hoạt protein không thể đảo ngược sẽ xảy ra.

Quy trình chuẩn bị tiêu chuẩn:

Chuẩn bị dung môi:

Chuẩn bị dung dịch axit axetic vô trùng 20mM chứa 0,1% BSA (hoặc protein mang có độ tinh khiết cao hơn) và lọc qua màng lọc 0,22μm.

Dung môi cần được-làm lạnh trước bằng đá trước khi sử dụng.

Thủ tục hoàn nguyên:

Thực hiện các thủ tục trên băng. Thêm 1,0 mL dung môi protein mang có tính axit-được làm lạnh trước vào lọ 1 mg.

Sử dụng micropipette để bơm mẫu thật chậm dọc theo thành chai, tránh tạo ra bọt khí hoặc tác động trực tiếp lên bánh-đông khô.

Đặt lọ trên đá vànhẹ nhàng xoay nó theo chiều ngang trong 5-10 phútcho đến khi bột tan hoàn toàn.Không xoáy, lắc, thổi hoặc khuấy mạnh.

Nồng độ cuối cùng: dung dịch gốc axit 1 mg/mL (khoảng 40 μM).

Pha loãng và pha loãng gradient:

Phân phối ngay lập tức thành liều duy nhất 2-10 µL bằng cách sử dụng ống ly tâm silan hóa có khả năng hấp phụ thấp trên đá.

Khi pha loãng, trước tiên hãy pha loãng dung dịch gốc axit ít nhất 100 lần với PBS hoặc môi trường nuôi cấy chứa 0,1-1% BSA để trung hòa độ pH. Ví dụ, lấy 1 µL dung dịch gốc và thêm nó vào 99 µL PBS chứa 1% BSA để thu được dung dịch trung gian 10 ug/mL.

Dung dịch trung gian sau đó được pha loãng đến nồng độ làm việc cuối cùng. Tất cả các bước pha loãng được thực hiện trên đá.

Dán nhãn rõ ràng: GDF-8, nồng độ, pH, ngày pha chế, số lô, nhiệt độ bảo quản.

Tham chiếu nồng độ làm việc:

Thí nghiệm tế bào trong ống nghiệm: Khoảng nồng độ thường được sử dụng là 0,1 đến 5 ug/mL (khoảng 4 đến 200 nM), cần được tối ưu hóa tùy theo loại tế bào và mục đích thử nghiệm.

Thí nghiệm trên động vật in vivo: Liều lượng phải được xác định nghiêm ngặt theo mẫu và đường dùng (ví dụ, trong phúc mạc, tiêm bắp, tiêm tĩnh mạch) dựa trên tài liệu. Phạm vi thường được sử dụng là từ ug/kg đến mg/kg vàphải tiến hành các thí nghiệm sơ bộ.

Ví dụ tính toán: Để chuẩn bị dung dịch làm việc 100 ng/mL, lấy 1 μL dung dịch trung gian 10 ug/mL và thêm vào 100 μL môi trường nuôi cấy.

Những điểm chính cần lưu ý:

Nhiệt độ thấp và dịu dàng: Toàn bộ quá trình phải được thực hiện trên băng và các động tác phải cực kỳ nhẹ nhàngđể ngăn ngừa sự biến tính protein.

Hòa tan axit cưỡng bức: Nó phải được hòa tan trong dung dịch đệm axit (pH 4-5), điều này rất quan trọng để duy trì độ hòa tan và hoạt động của nó.

Protein vận chuyển cưỡng bức: Việc hòa tan và pha loãng phải được thực hiện bằng các dung dịch chứa protein vận chuyển như BSAđể ngăn cản sự hấp phụ và kết tụ.

Chu kỳ đóng băng{0}}bị nghiêm cấm: Chu kỳ đóng băng{0}}rã đông lặp đi lặp lại đều bị nghiêm cấm; giải pháp phải được phân phối trong một lần. Dung dịch làm việc pha loãngkhông được lưu trữ; nó phải được chuẩn bị và sử dụng ngay lập tức.

Quan sát tình trạng: Sau khi pha, dung dịch phải trong và hơi đục. Sự hiện diện của bất kỳ chất keo tụ, hạt hoặc độ đục nào cho thấy protein đã bị biến tính và kết tụ, và dung dịch phải được loại bỏ.

2. Điều kiện bảo quản:

Bột đông khô chưa hoàn nguyên:

Chỉ lưu trữ: -80 độ (đóng băng sâu). Không bảo quản ở -20 độ.

Hạn sử dụng: 12 tháng ở -80 độ.

Tuyệt đối tránh ánh sáng: Bảo quản trong túi giấy nhôm chống sáng-có chất hút ẩm bên trong.

Dung dịch đã hoàn nguyên:

Phân phối ngay lập tức:Pha chếphải được hoàn thành trong vòng 5 phútsau khi hoàn nguyên.

Đóng gói lại và đông lạnh: Chỉ có thể được lưu trữ ở -80 độ, thời hạn sử dụng tối đa 2 tuần, không nên bảo quản.

Nghiêm cấm lưu trữ: Dung dịch làm việc được pha loãng phảikhông được lưu trữvà phải được bảo quản trên đá và sử dụng trong vòng 4 giờ.

Điều kiện vận chuyển:

Nó phải được vận chuyểndướiđá khô(-78 độ ) điều kiện.

Bao bì phải có đủ đá khô và lớp cách nhiệt để đảm bảo không bị tan băng trong suốt quá trình.

3. Tiêu chuẩn xử lý và độ ổn định:

Độ ổn định hóa lý:

Nó nhạy cảm với pH vàchỉ ổn định và hòa tan ở pH axit (4,0-5,0). Nó dễ dàng kết tụ và kết tủa ở pH trung tính và kiềm.

Nó cực kỳ nhạy cảm với ứng suất nhiệt và cơ học (xoáy, dao động, sủi bọt) và các chu kỳ đóng băng{0}}tan băng lặp đi lặp lại.

Nó nhạy cảm với sự hấp phụ bề mặt, do đó phải sử dụng protein mang và thùng chứa có khả năng hấp phụ thấp.

Duy trì hoạt tính sinh học:

bốn nguyên tắc: "hòa tan bằng axit, bảo vệ chất mang,-nhiệt độ thấp và nghiêm cấm chu kỳ đóng băng-tan băng ".

Nhu cầucó gì vui lòng liên hệchúng ta

Chú phổ biến: gdf-8 1mg/vial thúc đẩy đáng kể việc cải thiện khối lượng cơ và sức mạnh, gdf-8 1mg/vial của Trung Quốc thúc đẩy đáng kể khối lượng cơ và cải thiện sức mạnh các nhà sản xuất, nhà cung cấp, nhà máy